基因园与表达质粒库】小鼠、大鼠、人类、植物等基因克隆与表达质粒载体构建

北京泛基诺科技有限公司－基因克隆与质粒构建的专业化公司－基因技术蓝波湾

1.泛基诺－基因园

   泛基诺基因园拥有人、小鼠、大鼠、果蝇、拟南芥菜和酵母共计约8万个基因克隆，客户可将GenBank登记号或基因序列发送到以下信箱查询：

   客户信箱：  fungenome@126.com

   技术信箱：  fungenome@163.com

2.泛基诺－基因克隆蓝波湾

   承接人、小鼠、大鼠、果蝇、拟南芥菜和酵母的全长基因表达构建；并可根据客户要求将其克隆到特定的载体上。

   收费标准：根据具体情况定价

二、功能性表达构建: 将全长动、植物或人的ORF克隆到适用于不同宿主细胞的表达载体－质粒构建蓝波湾

A. 大肠杆菌表达克隆

(1). 自然产物表达

(2). 融合表达(如GST, HA, Myc, His6, Flag, His6-Flag,绿色荧光蛋白GFP,红色荧光蛋白DsRed)

B. 酵母表达

C. 植物表达

a)       CaMV 35S  Native表达

b)       GUS 融合表达

D. 哺乳类及人类细胞表达

(1). CMV Promoter

(2). 逆转录病毒表达

(3). 腺病毒和腺相关病毒AAV 表达

(4). 慢病毒表达

(4). 组织特异性表达—Albumin promoter for liver-specific expression

交货内容:含全长基因的质粒20μg,菌种1管,基因全序列测序报告文本和图像

收费标准:根据客户是否提供模版及载体的情形而定

三、双表达双定位载体的构建

 (1).双表达载体

      同一表达载体表达两个基因 (带可检测的通用标签如 His6,HA,FLAG,Myc,EGFP,DsRed等)， 主要用于蛋白质相互作用的研究（如免疫共沉淀CoIP），克服了质粒共转染时，两种质粒进入同一细胞的机率极低的问题。

 (2). 双定位载体

      同一表达载体表达两个基因，其中一个基因编码亚细胞特征蛋白(可融合绿色荧光蛋白)，另一个基因表达待定位的目的蛋白(可融合红色荧光蛋白)。由于红色和绿色在光谱上属于互补色,二者融合则显示黄色(见封2),因此极大地方便了蛋白质定位的研究,此一类型载体克服了质粒共转染时,两种质粒进入同一细胞机率极低的问题。

      收费标准：根据客户的要求而定。

四、复杂的载体构建 基因技术蓝波湾（No.1)

合成建库 两头进逼 克隆途中无险阻

      精心设计 多元拼接 构建道上无困难

     (1).多元基因表达

     (2).多个元件拼接或聚集

     (3).位点限制性改造(主要针对公司客户)

     (4).特殊元件拼接和改造(主要针对公司客户)

五、蛋白质相互作用

(1).GST Pulldown   

用途: 研究两个蛋白A和B之间是否存在直接相互作用

原理: 在基因水平将A蛋白编码序列与GST蛋白编码序列融合,构建GST-A融合蛋白表达载体后,表达和纯化GST-A融合蛋白；用体外翻 译法合成同位素标记的B蛋白(S35),再将GST-A融合蛋白珠子与[35S]B蛋白进行反应后离心、上样电泳、放射自显影.

(2).Coimmunoprecipitation   

(3).Yeast two-hybrid

收费标准：根据客户的要求而定

六、DNA-蛋白质相互作用

(1).酵母单杂交(Yeast one-hybrid) 

(2).荧虫酶报告基因分析(Luciferase Reporter)

(3).DNA-蛋白质凝胶迁移试验(Gel shift)

收费标准：根据客户的要求而定

七、转录因子(如p53 等)功能性突变检测系统:

一种新的酵母红-白斑报告基因检测系统。该系统的原理是：转录因子(如p53 等) 蛋白与靶基因的调节区结合激活下游报告基因；报告基因为ADE，其表达呈白色克隆,，报告株为ade突变型，无ADE表达时为红色克隆。当转录因子(如p53等) 为非功能性突变时，表现为红-白相间的克隆，当转录因子(如p53等)为功能性突变时，则完全为红色克隆。

八、基因定点突变

九、化学方法合成全长基因

最终产品内容：

1.含目的基因通用质粒一份

2.含上述质粒的菌株一份

3.基因序列100％正确的原始测序报告

十、基因检测标签的融合构建(His6，HA，FLAG，Myc，GFP，DsRed)

十一、基因旁侧区大片段调节序列的克隆

收费标准：根据客户的要求而定

 十二、引物延伸实验

收费标准：根据客户的要求而定

十三、 确定转录起始点

收费标准：根据客户的要求而定

十四、 RT-PCR定量分析及其产物克隆

收费标准：根据客户的要求而定

十五、 蛋白质定位及其相互作用综合服务

    生命科学新的知识生长点主要来自两个方面：一是发现新的功能基因，二是破解分子作用通路。蛋白质定位及其相互作用的研究不仅是认识新基因功能的必要手段，也是了解分子信号通路的关键环节。GST Pull-down (见7.1)揭示两个蛋白质之间是否存在直接相互作用，那么在体内是否也存在直接或间接相互作用呢？免疫共沉淀(CoIP)或Yeast two-hybrid 可以部分回答这一问题；最后的疑问是：这一相互作用在自然状态下是否存在? 为解决这一问题，则需诉诸活体细胞共定位试验(见封2彩图)!如果您有了上述一系列实验数据，那么您的论文向任何国际顶级期刊杂志投稿都不会因此而被拒。

收费标准：2.5万

十六、新基因功能研究

A. 咨询服务

长期从本公司订购试剂或与本公司有较多业务联系的客户可享受免费确咨询服务

B. 课题承接

客户提供新基因序列或模板,本公司将从多方面研究该基因的功能

收费标准(1)： 8 万   提供实验方法和结果

收费标准(2)： 10万   以英文形式按JBC或MCB的要求格式撰写论文

备注: 上述服务项目 (引物合成及测序除外), 客户应预付实验总费用的50％作为定金,余款在本公司向用户交货前一次性付清.

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北京泛基诺科技有限公司---基因克隆与质粒构建的专业化公司

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技术支持: 13681295021 

业务电话: 0-62081950