酵母选择营养缺陷培养基-缺素培养基与酵母表达质粒SD/SC-U一缺二缺三缺四缺五缺酵母转化
酵母选择营养缺陷培养基-缺素培养基与酵母表达质粒 SD/SC-U 一缺二缺三缺四缺五缺酵母转化
FunGenome Trp Leu His Ade Ura Met Minus Media系列产品集方便与增强于一身,是酵母遗传学、细胞与分子生物学实验室的最佳选择,泛基诺(F&G)产品驰名全国,享誉世界,其酵母选择营养培养基/缺素培养基广泛应用于酵母遗传、基因工程以及工具方法学(酵母双杂交、酵母单杂交)和动物、植物基因功能互补(Gene Complementation)实验(C-Test)等的研究中,涵盖酵母研究的一切主要方面和一切主要过程。
【分类导航】营养缺陷型标记基因的筛选和酵母转化、外源基因在酵母中的表达
酵母SD培养基-SC/Dropout-酵母营养缺陷型筛选标记-酵母组成型表达质粒启动子ADH/ADC/PGK与诱导型表达启动子GAL1及其选择营养缺陷标记基因
一、泛基诺(FunGenome)即用增强型培养基(方便增强型)
选择性营养缺陷型酵母培养基SD培养基(Synthetic Dropout Media) SC-Droupout
泛基诺酵母缺陷培养基种类:一缺培养基单缺培养基/二缺培养基双缺培养基/三缺培养基/四缺培养基/五缺培养基
(1).泛基诺一缺培养基:以SD/-Ura(Sc-Ura培养基)为代表的此类酵母SC选择培养基或SD缺陷培养基主要用于单质粒酵母转化筛选
用途:外源基因在酵母中的表达、异源基因功能互补、酵母单杂交系统和酵母双杂交系统初始质粒转化
SD/-Trp, SD/-Leu, SD/-His, SD/-Ura, SD/-Met, SD/-Ade
SC-Trp,SC-Leu, SC-His, SC-Ura, SC-Met, SC-Ade
(2).泛基诺(FunGenome)二缺培养基:此类酵母SC选择培养基-SD培养基用于双质粒酵母转化筛选
用途:外源基因在酵母中的表达(组成型表达或诱导型表达:参见泛基诺技术总监的文章:《外源基因在酵母中的表达》)、异源基因功能互补(参见泛基诺博文基因功能研究系列)、酵母单杂交系统(参见泛基诺《转录因子研究的夏日玫瑰》一文)和酵母双杂交系统(参见泛基诺《神奇的酵母遗传学》三篇系列文章)初始质粒转化、免疫共沉淀(Coimmunoprecipitation)、Y187和AH109 酵母交配实验、接合型二倍体筛选
SD/-Trp-Leu, SD/-Trp-His, SD/-Trp-Ade, SD/-Leu-Ade, SD/-His-Ade, SD/-Leu-His, SD/-Ura-Trp, SD/-Ura-Leu,SD/-Ura -His
SC-Trp-Leu, SC-Trp-His, SC-Trp-Ade, SC-Leu-Ade, SC-His-Ade, SC-Leu-His, SC-Ura-Trp, SC-Ura-Leu,SC -Ura-His
(3).泛基诺(FunGenome)三缺培养基:此类酵母SC选择培养基-SD培养基用于双质粒酵母转化筛选和报告基因检测
用途:外源基因在酵母中的表达、异源基因功能互补、酵母单杂交系统和酵母双杂交系统报告基因检测Y187和AH109 酵母交配实验后报告基因分析(His3,Ade2)
SD/-Trp-Leu-His, SD/-Trp-Leu-Ade, SD/-Ura-Trp-His, SD/-Ura-Leu-His, SD/-Trp-His-Ade, SD/-Ura-Trp-Leu
SC-Trp-Leu-His, SC-Trp-Leu-Ade, SC-Ura-Trp-His, SC-Ura-Leu-His ,SC-Trp-His-Ade, SC-Ura-Trp-Leu
(4).泛基诺(FunGenome)四缺培养基:此类酵母SC选择培养基-SD培养基主要用于报告基因分析
用途:酵母双杂交系统和酵母三杂交系统报告基因检测 、Y187和AH109 酵母交配实验后报告基因分析(His3,Ade2)
SD/-Trp-Leu-His-Ade, SD/-Ura-Trp-Leu-His, SD/-Ura-Trp-Leu-Met
SC-Trp-Leu-His-Ade, SC-Ura-Trp-Leu-His, SC-Ura-Trp-Leu-Met
(5).泛基诺(FunGenome)五缺培养基:此类酵母SC选择培养基-SD培养基主要用于报告基因分析和表型分析
用途:酵母三杂交系统报告基因检测(His3,Ade2)、酵母营养缺陷型分离鉴定和表型分析
SD/-Trp-Leu-His-Ade-Met, SD/-Ura-Trp-Leu-His-Ade,SD/-Ura-Trp-Leu-His-Met,SD/-Ura-Trp-Leu-Ade-Met,SD/-Ura-Leu-His-Ade-Met
SC-Trp-Leu-His-Ade-Met, SC-Ura-Trp-Leu-His-Ade,SC-Ura-Trp-Leu-His-Met,SC-Ura-Trp-Leu-Ade-Met,SC-Ura-Leu-His-Ade-Met
(6).泛基诺(FunGenome)六缺培养基:此类酵母SC选择培养基-SD培养基主要用于报告基因分析、表型分析和药物毒理分析
用途:酵母三杂交系统报告基因检测、酵母营养缺陷型分离鉴定和表型分析、药物毒理分析 SD/-Ura-Trp-Leu-His-Ade-Met, SC-Ura-Trp-Leu-His-Ade-Met
上述培养基称为选择性营养缺陷型酵母培养基,主要用于酵母质粒转化筛选,故又称为酵母选择培养基,培养基配方及配制方法注意事项等可参见下面的泛基诺温馨提示1,2,3
对于上述酵母筛选标记的解释可参见博文:《神奇的酵母遗传学与高等生物基因功能研究讲座三》
包装:40克/瓶
备注:此为[方便型]和[增强型]培养基,不需要添加酵母氮源YNB,直接加水配制即可)
全国各地经销商价格请联系QQ:2827505022
【外地客户可通过以下两种方法购置】:
1. 直接与我们联系购置事宜,一律先付款后发货。汇款核实到帐后,公司用特快专递发货。
2. 外地客户如不方便先付款,可委托当地任何客户自己熟悉的公司作为代理商与我们联系,或实时联系QQ:2827505022,我们通过QQ通知客户经销商的联系方式。
【培养基配制方法注意事项】
1、上述培养基含有各种所需成分(葡萄糖除外, 因为有些研究者需要用其他糖类如用半乳糖诱导GAL1启动子表达), 为各种氨基酸和酵母含氮碱/酵母氮源的精细混合物干粉,按照8g/L称取, 加水后即可配制成相应的培养液, 无需再购置添加Minimal SD Base或其他酵母氮源成分。高压灭菌后加无菌葡萄糖至终浓度为2%(或棉子糖)或实验所需的特定诱导物(如半乳糖用于GAL1启动子诱导表达的剂量或浓度为2%)即可, 适用于外源基因在酵母中的表达,酵母单杂交(yeast one-Hybrid)和酵母双杂交(yeast two-Hybrid)系统等的选择缺陷型培养, 筛选含特定标志基因的酵母表型。有关酵母表型与选择标记基因的理论问题可发电子邮件到 fungenome@126.com
2、在配制酵母缺陷培养基时,可以先加入葡萄糖后再高压,对酵母的生长不会产生严重影响。但如加入葡萄糖后再高压消毒则培养基会变色,由浅黄到深褐色不等,对细胞的生长还是有一定影响的(但在一般情况下不会影响实验)。FunGenome suggestion: 由于氨基酸和葡萄糖在高温高压下可起化学反应,因此泛基诺技术部不建议将葡萄糖加入后高压,而建议用上述提示1的方法配制。
3、FunGenome suggestion : 棉子糖和半乳糖原则上是不能高温高压的,因为在高温高压下其化学结构会发生变化从而对诱导效果产生抑止,这一点特别提醒研究者务必注意,尤其是在做表达调节介导的功能互补实验时至关重要!
4、制备平皿即软琼脂半固体培养基(琼脂粉按2%即每100ml加2克琼脂粉)用于转化筛选时,高压前需要将pH调至6.0左右(为方便起见,pH范围可在5.6-6.5之间变化),而液体培养基则不需要调pH。
二、无酵母氮源的氨基酸混合物(AA Dropout) Do Supplement
一缺Single Do、二缺Double Do、三缺Triple Do、四缺Quadruple Do、五缺Quintuple Do等
10g/每瓶
三、普通培养基
1).YPD培养基
2).YPDA培养基
3).YPD-plus培养基
4).Minimal SD Base
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四、酵母基因克隆与表达载体(克隆载体3400元/10ug, 表达载体4200元/10ug)
(一).泛基诺功能型骨架载体-----用于不同用途的功能研究和载体改造
1、泛基诺酵母基因组整合质粒(Yeast integrating plasmid, YIP)
(1).Trp筛选标志 (2).Ura筛选标志 (3).Leu筛选标志 (4).His筛选标志 (5).G418筛选标志
此类质粒经酶切线性化后可整合到酵母细胞基因组中
用途: a.基因取代或基因删除
2、泛基诺酵母中心粒-自主复制质粒(Yeast CEN-ARS plasmid, YCP)
(1).Trp筛选标志 (2).Ura筛选标志 (3).Leu筛选标志 (4).His筛选标志 (5).G418筛选标志
此类质粒在细胞内可自主复制,且由于含有中心粒复制序列,因此每个细胞近乎只有一个拷贝。
用途: 由于每个细胞平均只有一个拷贝,避免了目的基因的盈余表达,因而特别适用于基因功能的研究
3、泛基诺酵母附加体质粒(Yeast episomal plasmid, YEP)
(1).Trp筛选标志 (2).Ura筛选标志 (3).Leu筛选标志 (4).His筛选标志 (5).G418筛选标志
此类质粒在细胞内以附加体的形式高度复制, 每个细胞高达200-400个拷贝贝
用途: 用于外源基因的表达
(二). 酵母表达载体-详细信息和价格咨询可发电子邮件到:fungenome@126.com
1、GAL1启动子表达载体-----半乳糖诱导的表达载体
(1).Trp筛选标志 (2).Ura筛选标志 (3).Leu筛选标志 (4).His筛选标
2、Cup1启动子表达载体-----硫酸铜诱导的表达载体
(1).Trp筛选标志 (2).Ura筛选标志 (3).Leu筛选标志 (4).His筛选标志 (5).G418筛选标志
3、ADH启动子表达载体-ADC1组成型表达载体
(1).Trp筛选标志 (2).Ura筛选标志 (3).Leu筛选标志 (4).His筛选标志 (5).G418筛选标志
4、PGK启动子:营养选择基因标志与前述标志基因相同
五、高效酵母转化试剂及试剂盒 20T/Kit
【联系方式】全国各地客户(包括北京客户)与各地经销商可首选QQ联系,QQ全日在线值班,实时回复。
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