【经典酵母研究三合一】酵母增强缺素选择培养基-酵母表达质粒-酵母细胞基因型SD/SC-U 一缺二缺三缺四缺五缺与酵母转化

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经典版酵母选择营养缺陷-缺素培养基与酵母表达质粒-常用酵母基因型SD/SC-U 一缺二缺三缺四缺五缺与酵母转化
FunGenome Trp Leu His Ade Ura Met Minus Media系列产品集方便与增强于一身（即组合缺陷营养增强），是酵母遗传学、细胞与分子生物学实验室的最佳选择，泛基诺（F&G）产品驰名全国，享誉世界，其酵母选择营养培养基/缺素培养基广泛应用于酵母遗传、基因工程以及工具方法学（酵母双杂交、酵母单杂交）和动物、植物基因功能互补（Gene Complementation）实验（C-Test）等的研究中，涵盖酵母研究的一切主要方面和一切主要过程。
【分类导航】营养缺陷型标记基因的筛选和酵母转化、外源基因在酵母中的表达
酵母SD培养基-SC/Dropout-酵母营养缺陷型筛选标记-酵母组成型表达质粒启动子ADH/ADC/PGK与诱导型表达启动子GAL1及其选择营养缺陷标记基因
一、泛基诺（FunGenome）即用增强型培养基（方便增强型）
选择性营养缺陷型酵母培养基SD培养基(Synthetic Dropout Media) SC-Droupout
泛基诺酵母缺陷培养基种类：一缺培养基单缺培养基/二缺培养基双缺培养基/三缺培养基/四缺培养基/五缺培养基
(1).泛基诺一缺培养基：以SD/-Ura(Sc-Ura培养基)为代表的此类酵母SC选择培养基或SD缺陷培养基主要用于单质粒酵母转化筛选
用途：外源基因在酵母中的表达、异源基因功能互补、酵母单杂交系统和酵母双杂交系统初始质粒转化
SD/-Trp, SD/-Leu, SD/-His, SD/-Ura, SD/-Met, SD/-Ade
SC-Trp,SC-Leu, SC-His, SC-Ura, SC-Met, SC-Ade
(2).泛基诺(FunGenome)二缺培养基：此类酵母SC选择培养基－SD培养基用于双质粒酵母转化筛选
用途：外源基因在酵母中的表达（组成型表达或诱导型表达：参见泛基诺技术总监的文章：《外源基因在酵母中的表达》）、异源基因功能互补（参见泛基诺博文基因功能研究系列）、酵母单杂交系统（参见泛基诺《转录因子研究的夏日玫瑰》一文）和酵母双杂交系统（参见泛基诺《神奇的酵母遗传学》三篇系列文章）初始质粒转化、免疫共沉淀（Coimmunoprecipitation)、Y187和AH109 酵母交配实验、接合型二倍体筛选
SD/-Trp-Leu, SD/-Trp-His, SD/-Trp-Ade, SD/-Leu-Ade, SD/-His-Ade, SD/-Leu-His, SD/-Ura-Trp, SD/-Ura-Leu,SD/-Ura -His
SC-Trp-Leu, SC-Trp-His, SC-Trp-Ade, SC-Leu-Ade, SC-His-Ade, SC-Leu-His, SC-Ura-Trp, SC-Ura-Leu，SC -Ura-His
(3).泛基诺(FunGenome)三缺培养基：此类酵母SC选择培养基－SD培养基用于双质粒酵母转化筛选和报告基因检测
用途：外源基因在酵母中的表达、异源基因功能互补、酵母单杂交系统和酵母双杂交系统报告基因检测Y187和AH109 酵母交配实验后报告基因分析（His3,Ade2)
SD/-Trp-Leu-His, SD/-Trp-Leu-Ade, SD/-Ura-Trp-His, SD/-Ura-Leu-His, SD/-Trp-His-Ade, SD/-Ura-Trp-Leu
SC-Trp-Leu-His, SC-Trp-Leu-Ade, SC-Ura-Trp-His, SC-Ura-Leu-His ,SC-Trp-His-Ade, SC-Ura-Trp-Leu
(4).泛基诺(FunGenome)四缺培养基：此类酵母SC选择培养基－SD培养基主要用于报告基因分析
用途：酵母双杂交系统和酵母三杂交系统报告基因检测、Y187和AH109 酵母交配实验后报告基因分析(His3,Ade2)
SD/-Trp-Leu-His-Ade, SD/-Ura-Trp-Leu-His, SD/-Ura-Trp-Leu-Met
SC-Trp-Leu-His-Ade, SC-Ura-Trp-Leu-His, SC-Ura-Trp-Leu-Met
(5).泛基诺(FunGenome)五缺培养基：此类酵母SC选择培养基－SD培养基主要用于报告基因分析和表型分析
用途：酵母三杂交系统报告基因检测(His3,Ade2)、酵母营养缺陷型分离鉴定和表型分析
SD/-Trp-Leu-His-Ade-Met, SD/-Ura-Trp-Leu-His-Ade,SD/-Ura-Trp-Leu-His-Met,SD/-Ura-Trp-Leu-Ade-Met，SD/-Ura-Leu-His-Ade-Met
SC-Trp-Leu-His-Ade-Met, SC-Ura-Trp-Leu-His-Ade,SC-Ura-Trp-Leu-His-Met,SC-Ura-Trp-Leu-Ade-Met，SC-Ura-Leu-His-Ade-Met
(6).泛基诺(FunGenome)六缺培养基：此类酵母SC选择培养基－SD培养基主要用于报告基因分析、表型分析和药物毒理分析
用途：酵母三杂交系统报告基因检测、酵母营养缺陷型分离鉴定和表型分析、药物毒理分析 SD/-Ura-Trp-Leu-His-Ade-Met, SC-Ura-Trp-Leu-His-Ade-Met
上述培养基称为选择性营养缺陷型酵母培养基,主要用于酵母质粒转化筛选,故又称为酵母选择培养基,培养基配方及配制方法注意事项等可参见下面的泛基诺温馨提示1,2,3
对于上述酵母筛选标记的解释可参见博文：《神奇的酵母遗传学与高等生物基因功能研究讲座三》
包装：40克/瓶
备注：此为[方便型]和[增强型]培养基，不需要添加酵母氮源YNB，直接加水配制即可）
全国各地经销商价格请联系QQ：2827505022
【外地客户可通过以下两种方法购置】:
1. 直接与我们联系购置事宜，一律先付款后发货。汇款核实到帐后，公司用特快专递发货。
2. 外地客户如不方便先付款，可委托当地任何客户自己熟悉的公司作为代理商与我们联系，或实时联系QQ：2827505022，我们通过QQ通知客户经销商的联系方式。
【培养基配制方法注意事项】
1、上述培养基含有各种所需成分(葡萄糖除外, 因为有些研究者需要用其他糖类如用半乳糖诱导GAL1启动子表达), 为各种氨基酸和酵母含氮碱/酵母氮源的精细混合物干粉，按照8g/L称取, 加水后即可配制成相应的培养液, 无需再购置添加Minimal SD Base或其他酵母氮源成分。高压灭菌后加无菌葡萄糖至终浓度为2％(或棉子糖)或实验所需的特定诱导物(如半乳糖用于GAL1启动子诱导表达的剂量或浓度为2%)即可, 适用于外源基因在酵母中的表达，酵母单杂交(yeast one-Hybrid)和酵母双杂交(yeast two-Hybrid)系统等的选择缺陷型培养，筛选含特定标志基因的酵母表型。有关酵母表型与选择标记基因的理论问题可发电子邮件到 fungenome@126.com 进行详细咨询。Those powders from FunGenome are easy for making liquid, solid and semi-solid media.
2、在配制酵母缺陷培养基时，可以先加入葡萄糖后再高压，对酵母的生长不会产生严重影响。但如加入葡萄糖后再高压消毒则培养基会变色，由浅黄到深褐色不等，对细胞的生长还是有一定影响的（但在一般情况下不会影响实验）。FunGenome suggestion: 由于氨基酸和葡萄糖在高温高压下可起化学反应，因此泛基诺技术部不建议将葡萄糖加入后高压，而建议用上述提示1的方法配制。
3、FunGenome suggestion : 棉子糖和半乳糖原则上是不能高温高压的，因为在高温高压下其化学结构会发生变化从而对诱导效果产生抑止，这一点特别提醒研究者务必注意，尤其是在做表达调节介导的功能互补实验时至关重要！
4、制备平皿即软琼脂半固体培养基（琼脂粉按2％即每100ml加2克琼脂粉）用于转化筛选时，高压前需要将pH调至6.0左右（为方便起见，pH范围可在5.6-6.5之间变化），而液体培养基则不需要调pH。
二、无酵母氮源的氨基酸混合物(AA Dropout) Do Supplement
一缺Single Do、二缺Double Do、三缺Triple Do、四缺Quadruple Do、五缺Quintuple Do等
10g/每瓶
三、普通培养基
1).YPD培养基 YPD media 250克/瓶
2).YPDA培养基 YPDA media 250克/瓶
3).YPD-plus培养基 YPD-plus media 250克/瓶
4).Minimal SD Base ---------------------267克/瓶

5）YNB（Yeast Nitrogen Base） 100克/瓶
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电子邮箱：fungenome@126.com
四、酵母基因克隆与表达载体(克隆载体3400元/10ug, 表达载体4200元/10ug)
(一).泛基诺功能型骨架载体-----用于不同用途的功能研究和载体改造
1、泛基诺酵母基因组整合质粒(Yeast integrating plasmid, YIP)
(1).Trp筛选标志 (2).Ura筛选标志 (3).Leu筛选标志 (4).His筛选标志 (5).G418筛选标志
此类质粒经酶切线性化后可整合到酵母细胞基因组中
用途: a.基因取代或基因删除 b.稳定型表达元件的整合(integration)和敲入(knock in)
2、泛基诺酵母中心粒-自主复制质粒(Yeast CEN-ARS plasmid, YCP)
(1).Trp筛选标志 (2).Ura筛选标志 (3).Leu筛选标志 (4).His筛选标志 (5).G418筛选标志
此类质粒在细胞内可自主复制,且由于含有中心粒复制序列,因此每个细胞近乎只有一个拷贝。
用途: 由于每个细胞平均只有一个拷贝,避免了目的基因的盈余表达,因而特别适用于基因功能的研究
3、泛基诺酵母附加体质粒(Yeast episomal plasmid, YEP)
(1).Trp筛选标志 (2).Ura筛选标志 (3).Leu筛选标志 (4).His筛选标志 (5).G418筛选标志
此类质粒在细胞内以附加体的形式高度复制, 每个细胞高达200-400个拷贝贝
用途: 用于外源基因的表达
(二). 酵母表达载体－详细信息和价格咨询可发电子邮件到：fungenome@126.com
1、GAL1启动子表达载体-----半乳糖诱导的表达载体
(1).Trp筛选标志 (2).Ura筛选标志 (3).Leu筛选标志 (4).His筛选标
2、Cup1启动子表达载体-----硫酸铜诱导的表达载体
(1).Trp筛选标志 (2).Ura筛选标志 (3).Leu筛选标志 (4).His筛选标志 (5).G418筛选标志
3、ADH启动子表达载体-ADC1组成型表达载体
(1).Trp筛选标志 (2).Ura筛选标志 (3).Leu筛选标志 (4).His筛选标志 (5).G418筛选标志
4、PGK启动子：营养选择基因标志与前述标志基因相同

五、酵母转化试剂及试剂盒--高效酵母转化试剂及试剂盒 20T/Kit

1. 普通转化试剂

1) 50％PEG4000－无菌液体

2) 10X LiAc－无菌液体

3) 运载体DNA (Carrier DNA,10mg/ml )

2. 高效酵母转化试剂盒（YGM011）------/20次/1Kit

六、酵母质粒回收试剂盒(YGM012)-------/20次/1Kit

简介：从酵母细胞中回收质粒是酵母遗传学重要的实验技术, 在酵母单、双、三杂交实验中更是不可或缺。很多实验者按照出版的技术资料如分子克隆和现代分子生物学操作手册等往往都回收不到质粒, FunGenome酵母质粒回收试剂盒提供的操作程序是酵母细胞质粒回收的最佳选择, 具有高效性和重复性好等优点。

七、常用酵母细胞表型资料(phenotype)-基因型(genotype)

Y187 MATα ura3-52, his3-200, ade2-101, trp1-901,leu2-3, 112, gal4Δ, met–, gal80Δ,

MEL1,URA3::GAL1UAS - GAL1TATA-lacZ

AH109 MATa, trp1-901, leu2-3, 112, ura3-52, his3-200,gal4Δ, gal80Δ,

LYS2::GAL1UAS-GAL1TATA-HIS3, GAL2UAS-GAL2TATA-ADE2,

URA3::MEL1UAS-MEL1TATA-lacZ, MEL1
YPH499 MATa: ade2-101ochre his3-△200 leu-△1 lys2-801amber trp1△1-63 ura3-52

YHP500 MATα: ade2-101ochre his3-△200 leu-△1 lys2-801amber trp1△1-63 ura3-52

W303-1A MATa: leu2-3, -112; his3-11, -15; trp1-1; ura3-1; ade2-1; can1-100

W303-1B MATα: ade2-1 leu2-3,112 his311 his3-15 trp1-1 ura3-1)

BY4741 MATa:his3?1 leu2?0 met15?0 ura3?0

BY4742 MATα:his3?1 leu2?0 met15?0 ura3?0

YM4271 MATa, ura3-52, his3-200, ade2-101, lys2-801, leu2-3, 112, trp1-901,
tyr1-501, gal4-D512, gal80-D538, ade5::hisG （酵母单杂交系统报告菌株）

JRY2726 MATa:his4

JRY2728 MATα:his4

FGN2749 蛋白酶缺陷株-----用于易降解或不稳定蛋白的高效表达与纯化

MaV203 MATα: leu2-3,112, trp1-901, his3Δ200, ade2-101, gal4Δ, gal80Δ,
SPAL10::URA3, GAL1::lacZ, HIS3UAS GAL1::HIS3@LYS2, can1R, cyh2R) (Vidal, 1997)

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S288C
Genotype: MATα SUC2 gal2 mal mel flo1 flo8-1 hap1 ho bio1 bio6
Notes: Strain used in the systematic sequencing project, the sequence stored in SGD. S288C does not form pseudohyphae. In addition, since it has a mutated copy of HAP1, it is not a good strain for mitochondrial studies. It has an allelic variant of MIP1 which increases petite frequency. S288C strains are gal2- and they do not use galactose anaerobically.
The S288C genome was recently resequenced at the Sanger Institute.

YPH499
Genotype: MATa ura3-52 lys2-801_amber ade2-101_ochre trp1-Δ63 his3-Δ200 leu2-Δ1
Notes: Contains nonrevertible (deletion) auxotrophic mutations that can be used for selection of vectors. Note that trp1-Δ63, unlike trp1-Δ1, does not delete adjacent GAL3 UAS sequence and retains homology to TRP1 selectable marker. gal2-, does not use galactose anaerobically.

YPH500
Genotype: MATα ura3-52 lys2-801_amber ade2-101_ochre trp1-Δ63 his3-Δ200 leu2-Δ1
Notes:MATα strain isogenic to YPH499 except at mating type locus.

YPH501
Genotype: MATa/MATα ura3-52/ura3-52 lys2-801_amber/lys2-801_amber ade2-101_ochre/ade2-101_ochre trp1-Δ63/trp1- Δ63 his3-Δ200/his3-Δ200 leu2-Δ1/leu2-Δ1
Notes: a/α diploid isogenic to YPH499 and YPH500.

W303-1A
Genotype: MATa {leu2-3,112 trp1-1 can1-100 ura3-1 ade2-1 his3-11,15}
Notes: W303-1A possesses a ybp1-1 mutation (I7L, F328V, K343E, N571D) which abolishes Ybp1p function, increasing sensitivity to oxidative stress.

W303-1B
Genotype: MATα {leu2-3,112 trp1-1 can1-100 ura3-1 ade2-1 his3-11,15}

W303
Genotype: MATa/MATα {leu2-3,112 trp1-1 can1-100 ura3-1 ade2-1 his3-11,15} [phi+]
Notes: W303 also contains a bud4 mutation that causes haploids to bud with a mixture of axial and bipolar budding patterns. In addition, the original W303 strain contains the rad5-535 allele. As S288c, W303 has an allelic variant of MIP1 which increases petite frequency.
The W303 genome was sequenced at the Sanger Institute